技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體試劑盒
【獸用名稱】
通 用 名 豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒
商 品 名 無
英 文 名 Blocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus Antibody
漢語拼音 Zhu WeikuangquanbingbingdugBdanbai Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe
【主要組分與含量】
組分 | 含量 | 含量 | 含量 |
(1)抗原包被板 | 1板 | 2板 | 5板 |
(2)陽性對照 | 1ml*1(藍(lán)蓋) | 1.5ml*1 | 2ml*1 |
(3)陰性對照 | 1ml*1(紅蓋) | 1.5ml*1 | 2ml*1 |
(4)酶標(biāo)記物 | 11ml*1(綠蓋) | 25ml*1 | 60ml*1 |
(5)樣品稀釋液 | 25ml*1(藍(lán)蓋) | 50ml*1 | 150ml*1 |
(6)20倍濃縮洗滌液 | 25ml*1 (黃蓋) | 50ml*1 | 150ml*1 |
(7)底物顯色液 | 11ml*1(棕蓋) | 20ml*1 | 50ml*1 |
(8)終止液 | 6ml*1 (紅蓋) | 11ml*1 | 26ml*1 |
(9)血清稀釋板 | 1板 | 2板 | 5板 |
(10)說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
【作用與用途】 用于檢測豬偽狂犬病毒抗體。
【注意事項(xiàng)】
(1) 試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至20~25℃,使用后放回2~8℃保存。
(2) 不同批號的試劑盒組分不得混用,不同試劑使用時應(yīng)防止交叉污染。
(3) 底物液和終止液不能暴露于強(qiáng)光或接觸氧化劑。
(4) 待檢血清數(shù)量較多時,應(yīng)先稀釋完所有待檢血清,再加到抗原包被板上,使反應(yīng)時間一致。
(5) 移液時應(yīng)盡量準(zhǔn)確,防止產(chǎn)生氣泡。
(6) 應(yīng)嚴(yán)格遵守各操作步驟規(guī)定的時間和溫度。【用法與判定】
1 用法
1.1 樣品準(zhǔn)備 取動物全血,待血液凝固后,4000r/min離心10分鐘,收集上清?;虿杉?,待凝固后自然析出血清。血清應(yīng)清亮,無溶血。
1.2 樣品稀釋 在血清稀釋板中,用樣品稀釋液按1:1的比例稀釋待檢血清(例如:120μl樣品稀釋液中加120μl待檢血清);陰性、陽性對照不稀釋,直接使用。
1.3 洗滌液配制20倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫(20~25℃),然后用蒸餾水或純水作20倍稀釋。
1.4 操作步驟
1.4.1 取抗原包被板(根據(jù)樣本多少,可拆開分次使用),每孔加入稀釋好的洗滌液300µl,不必靜置,棄掉孔中洗滌液,洗滌2次,拍干。每孔加入稀釋好的樣本100μl;另外設(shè)陽性對照、陰性對照各2孔,100μl/孔。置37℃孵育60分鐘。
1.4.2 棄去板中液體,每孔加入稀釋好的洗滌液300µl,棄掉孔中洗滌液,重復(fù)洗滌共計(jì)洗板5次,拍干。
1.4.3 每孔加入100μl酶結(jié)合物,輕微振蕩混勻。置37℃下孵育30分鐘。
1.4.4 棄去板中液體,洗滌5次,方法同1.4.2。
1.4.5 每孔加底物顯色液100µl,室溫(20~25℃)避光顯色10分鐘。
1.4.6 每孔加終止液50µl。10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定并記錄各孔在630nm波長處的吸光度(OD)值。
2 判定
2.1 成立條件 陰性對照孔的OD630nm平均值與陽性對照孔OD630nm平均值之差應(yīng)≥0.6。
2.2 判定標(biāo)準(zhǔn) S為樣品孔OD630nm值,N為陰性對照OD630nm平均值。如果S/N≤0.6判為陽性。如果0.6<S/N≤0.7判為可疑。如果S/N>0.7判為陰性。在酶標(biāo)儀上測各孔OD630nm值,試驗(yàn)成立條件是陰性對照的OD630nm平均值≥0.6,陽性對照的OD630nm平均值≤0.5
【規(guī)格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒
【貯藏與有效期】 2~8℃保存,有效期為12個月。
僅供科研使用
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